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南京生物制品有限公司談蛭弧菌凍干粉應(yīng)用前景

2018-12-05 11:18:20   

近兩年,蛭弧菌凍干粉市場(chǎng)突然大熱起來。細(xì)思下來,一方面水產(chǎn)養(yǎng)殖的密度在增加,各種未知疾病或者混合型疾病日益增多;另一方面,從公司至經(jīng)銷商再到養(yǎng)殖戶,面對(duì)日益增加又難以查明的疾病,多數(shù)是束手無策,很多化學(xué)型消毒劑,效果來的快去的也快,有時(shí)候刺激大一些,而且也不能總是經(jīng)常使用,因此蛭弧菌又重新被大家推廣起來。

近期,江蘇南京新的生物制品有限公司于10月中旬在蛭弧菌凍干上面投入近百萬采購了一臺(tái)大型凍干機(jī)(單次凍干1萬瓶),實(shí)現(xiàn)了從蛭弧菌母液發(fā)酵到凍干全過程的可控制。這種近百萬的大型凍干機(jī)投入到底劃算不劃算?為此筆者采訪了南京新的生物制品有限公司負(fù)責(zé)水產(chǎn)事業(yè)版塊的趙經(jīng)理,希望就蛭弧菌的凍干產(chǎn)品做一些了解。

問:蛭弧菌和普通微生物產(chǎn)品有什么不同?趙經(jīng)理:首先,效果表達(dá)的途徑不一樣。普通微生物在水產(chǎn)養(yǎng)殖上發(fā)揮效果大多數(shù)是通過“占位理論”實(shí)現(xiàn)的(在體外或體內(nèi)),或者通過分泌胞外物質(zhì)抑制其他微生物繁殖而發(fā)揮效果,而蛭弧菌不是,蛭弧菌具有“不服則干”的特性,其通過寄生和裂解的生理手段,能在體外直接殺滅一些有害菌,還能在體內(nèi)發(fā)揮有益微生物的效果,這使得蛭弧菌有著益生素和“活性抗生素”的雙重特性。

其次,在發(fā)酵上面,普通微生物發(fā)酵是在人工合成的培養(yǎng)基里接種菌種。而蛭弧菌發(fā)酵則要先生產(chǎn)大腸桿菌,提供宿主菌,再接種蛭弧菌種。

另外,普通的微生物一般是通過無性二分裂方式繁殖,而蛭弧菌是通過復(fù)制的方式繁殖。前者繁殖速度很快,后者的速度較慢。

問:為什么南京新的生物在凍干設(shè)備上投入近百萬?

趙經(jīng)理:南京新的生物制品有限公司之所以在凍干設(shè)備上投入如此資金,主要是考慮以下幾點(diǎn):

1.南京新的生物生產(chǎn)蛭弧菌已有10多年的時(shí)間,蛭弧菌產(chǎn)品的演變也一直非常關(guān)注,最早的液體產(chǎn)品,我們就一直用發(fā)酵罐進(jìn)行生產(chǎn),但是液體產(chǎn)品的保藏始終面臨一些問題,這對(duì)實(shí)際使用效果有非常大的影響,南京新的生物也一直在思考如何突破技術(shù)和成本的雙重難關(guān),而凍干則是最好的一種保存方式。

2.我們一直在關(guān)注凍干,也組織了專家對(duì)凍干產(chǎn)品的原理及與蛭弧菌的結(jié)合做了論證,早期主要是硬件的成本投資太高,同時(shí)產(chǎn)品銷量預(yù)估受第一階段蛭弧菌下降的影響,未敢一次性投入,于是采取代工的形式生產(chǎn)蛭弧菌凍干粉,此期間,我們做了大量的試驗(yàn),確保了蛭弧菌凍干粉產(chǎn)品的穩(wěn)定性,同時(shí)也確定了蛭弧菌原裝凍干在產(chǎn)品保質(zhì)期上的突破具有無與倫比的優(yōu)勢(shì)。

3.近兩年養(yǎng)殖密度整體是呈現(xiàn)上升趨勢(shì),而且生態(tài)防控這個(gè)概念也不斷加強(qiáng),水體內(nèi)的總菌數(shù)、異養(yǎng)菌數(shù)、弧菌數(shù)的控制變成一個(gè)難題,只依靠化學(xué)類消毒劑無法完成這個(gè)工作,因?yàn)榛瘜W(xué)消毒劑效果來得很快,但去的也很快,而蛭弧菌恰恰可以彌補(bǔ)這個(gè)缺陷,因?yàn)轵位【娜秉c(diǎn)是效果來得慢一些,但是中后期的防控時(shí)間特別長(zhǎng),其發(fā)揮的效果基本可以達(dá)到15天左右,同時(shí)再加上成品質(zhì)量的穩(wěn)定性在不斷進(jìn)步,所以使用效果上面得到了較好的體現(xiàn),產(chǎn)品的總量也在增加。

4.我們本身有很多的代工客戶,很多都是在我們公司代工生產(chǎn)蛭弧菌液體,這兩年隨著市場(chǎng)對(duì)蛭弧菌凍干粉的呼聲越發(fā)高漲,他們也在催促我們上一臺(tái)凍干機(jī),可以讓他們有更多的選擇。

綜合以上幾個(gè)方面,公司在2018年下定決心,于10月份采購了一臺(tái)價(jià)值近百萬的大型凍干機(jī),以完成從蛭弧菌母液發(fā)酵至蛭弧菌凍干的全程掌控,從而能為客戶提供穩(wěn)定的蛭弧菌原裝凍干產(chǎn)品。

問:蛭弧菌“原裝凍干”有哪些產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)?趙經(jīng)理:目前蛭弧菌類產(chǎn)品基本上有兩類,一是液體,一是凍干粉。

蛭弧菌液體的產(chǎn)品始終面臨保存的問題,實(shí)際上也有很多的論文對(duì)此做了研究,有的文章指出,大多數(shù)的液體蛭弧菌產(chǎn)品在4℃的環(huán)境下,可以保存8個(gè)月以上,少數(shù)6個(gè)月以上。但在25℃的環(huán)境下,蛭弧菌液體產(chǎn)品的保質(zhì)一般只在4個(gè)~6個(gè)月了。

當(dāng)然隨著保護(hù)劑的不斷研發(fā),隨著添加不同的保護(hù)劑,在4℃的環(huán)境下,某些液體產(chǎn)品的保質(zhì)期可以達(dá)到15個(gè)月以上,有的可以達(dá)到兩年以上,但是所有的保存環(huán)境溫度都指向4℃,這對(duì)我們實(shí)際的銷售場(chǎng)景是不太相符的。當(dāng)然,液體也有好處,菌種復(fù)蘇時(shí)間快,如果從實(shí)際銷售出發(fā),建議在經(jīng)銷點(diǎn)增設(shè)冷藏柜,這樣可以延長(zhǎng)液體產(chǎn)品的保持期。

另外,就是目前大家所接觸比較多的蛭弧菌凍干產(chǎn)品了,尤其是強(qiáng)調(diào)蛭弧菌原裝凍干產(chǎn)品。在相關(guān)的研究中,4℃的環(huán)境下,添加了保護(hù)劑的蛭弧菌液體產(chǎn)品在13個(gè)月后其復(fù)蘇率為100%,而同樣的環(huán)境下,凍干產(chǎn)品在21個(gè)月后其復(fù)蘇率仍為100%。

而且真正的蛭弧菌原裝凍干產(chǎn)品,具有以下優(yōu)點(diǎn):

1.冷凍干燥生產(chǎn)工藝是在低溫下進(jìn)行的,對(duì)于許多熱敏性的物質(zhì)特別適用。蛭弧菌不會(huì)發(fā)生變性或失去生物活力,這一點(diǎn)非常重要。

2.整個(gè)冷凍生產(chǎn)過程基本上是在低溫真空狀態(tài)下完成的,在這種狀態(tài)下,微生物的生長(zhǎng)和酶作用是受到抑制的,可以很好地保證蛭弧菌產(chǎn)品的穩(wěn)定性。

3.因在真空下操作,氧氣極少,因此,一些易氧化的物質(zhì)(如油脂類)得到保護(hù)。

4.冷凍干燥法能排除95%~99%以上的水分,產(chǎn)品能長(zhǎng)期保存而不變質(zhì)。

以上就是蛭弧菌凍干產(chǎn)品的優(yōu)勢(shì)所在,也是其穩(wěn)定性的保障所在。

問:蛭弧菌原裝凍干產(chǎn)品有什么特征?

趙經(jīng)理:市面上有很多蛭弧菌凍干粉,有很多是呈現(xiàn)流動(dòng)性粉狀的,也有一些是塊狀的,可能是生產(chǎn)工藝有所差別。但我們還是認(rèn)為“原裝凍干”是一種最好的工藝,最主要是原裝凍干是在凍干機(jī)內(nèi)完成封裝的,瓶?jī)?nèi)保持著真空凍干狀態(tài),能最大可能地保存產(chǎn)品的活性,提供產(chǎn)品最好的穩(wěn)定性,原裝凍干產(chǎn)品一般有以下幾個(gè)特征:

第一、產(chǎn)品在小的西林瓶中呈現(xiàn)的是一種塊狀物,用手拿起瓶子晃動(dòng),感覺像一塊小小的泡沫,有很輕的感覺。另外,就是西林瓶裝的原裝凍干產(chǎn)品肯定不可能是粉劑。

第二、原裝凍干和非原裝凍干產(chǎn)品在包裝上也有所差異,雖然都是西林裝封裝的,但是兩種產(chǎn)品封裝的瓶蓋都會(huì)存在明顯差異,主要的原因在于凍干的過程中需要做適當(dāng)保護(hù),不能直接將液體暴露在環(huán)境中,需要在西林瓶上進(jìn)行遮蓋,但完全遮蓋是不行的,這會(huì)阻擋冰的升華,所以需要用一種帶導(dǎo)氣槽的橡膠皮塞進(jìn)行半遮蓋,讓瓶?jī)?nèi)、外的空氣可以流動(dòng),不會(huì)阻擋冰的升華,而在一般環(huán)境下生產(chǎn)的產(chǎn)品是不需要用這種帶導(dǎo)氣槽的橡膠皮塞的,差異還是很明顯的。

第三、去掉西林瓶蓋上的塑料和鋁包片后,只留下橡膠瓶蓋的時(shí)候,用手拔出橡膠瓶蓋的時(shí)候,你會(huì)明顯的聽到“嘣”的一聲,可以看到凍干的塊狀物在瓶中的跳動(dòng),主要的原因,是因?yàn)樵b凍干是在凍干機(jī)中直接完成封蓋的過程,瓶體中是處于一種真空狀態(tài)的,因此在拔出瓶蓋時(shí),因?yàn)槠績(jī)?nèi)、外壓力的差異極大,空氣的快速流動(dòng)引起了“嘣”的聲音產(chǎn)生,同時(shí)塊狀物會(huì)跳動(dòng)。

第四、極易吸水,1秒溶解。直接的表現(xiàn)就是將水倒進(jìn)小瓶?jī)?nèi),小瓶里的物料1秒就溶解完了,而且溶解均勻。實(shí)際上,這主要因?yàn)楸桓稍镂锪虾械乃质窃趦鼋Y(jié)狀態(tài)下直接蒸發(fā)的,故在干燥過程中,水汽不帶動(dòng)可溶性物質(zhì)移向物料表面,不會(huì)在物料表面沉積鹽類,即在物料表面不會(huì)形成硬質(zhì)薄皮,亦不存在因中心水分移向物料表面時(shí)對(duì)細(xì)胞或纖維產(chǎn)生的張力,不會(huì)使物料干燥后因收縮引起變形,故極易吸水恢復(fù)原狀。

問:蛭弧菌如何在水產(chǎn)養(yǎng)殖中如何合理應(yīng)用?趙經(jīng)理:任何一種產(chǎn)品要研究其如何應(yīng)用,肯定是分兩個(gè)層面進(jìn)行探究,一是要符合產(chǎn)品的基本特性,不能違背基本規(guī)律;二是在實(shí)際應(yīng)用場(chǎng)景中,要和現(xiàn)實(shí)相結(jié)合,尋找最佳的使用方法。

首先要了解蛭弧菌的幾個(gè)特性:蛭弧菌的生長(zhǎng),一般要求pH6.0-8.5;溫度23℃~37℃,低于12℃,高于42℃時(shí)均不生長(zhǎng);能穩(wěn)定分解蛋白質(zhì),一般不利用碳水化合物,而以肽、氨基酸作碳源和能源;能液化明膠;嚴(yán)格好氧。同時(shí)蛭弧菌的靶向性問題并沒有很多的研究,但總體上其偏向革蘭氏陰性桿菌,只裂解較為少數(shù)的革蘭氏陽性桿菌。同時(shí),蛭弧菌的安全性也得到了一些論文的驗(yàn)證,迄今為止,相關(guān)報(bào)道表明,蛭弧菌對(duì)人和某些動(dòng)物無毒害作用。

在實(shí)際使用中需要注意以下幾點(diǎn):

第一、溫度不在適宜范圍的時(shí)候,蛭弧菌生長(zhǎng)是非常緩慢的,所以使用時(shí)要充分考慮這一點(diǎn)。比如3月、4月份用它去泡苗,效果肯定不會(huì)好,但如果改成拌料投喂,則會(huì)對(duì)腸道控菌產(chǎn)生積極影響??傮w來說,蛭弧菌使用主要分為內(nèi)服和外潑兩個(gè)方面,內(nèi)服不受溫度限制,而外潑則要考慮溫度問題。

第二、蛭弧菌的繁殖是需要氧氣的,使用的時(shí)候也建議在早上8點(diǎn)~10點(diǎn)使用,這樣可以獲得較為充足的溶氧。另外,其耗氧不會(huì)達(dá)到非常劇烈的程度,因?yàn)槠浞敝炒鷷r(shí)一般要4小時(shí)~6小時(shí)。

第三、蛭弧菌的安全性應(yīng)該如何得到最大化的利用呢?

實(shí)際上,我們重點(diǎn)推薦在甲殼類動(dòng)物脫殼期使用蛭弧菌產(chǎn)品,因?yàn)榧讱ゎ悇?dòng)物在脫殼期是非常虛弱的,也極易被一些有害菌感染,控菌工作非常重要,但是一些化學(xué)消毒劑存在刺激性,同時(shí)來的快、去的快,意義不大。而蛭弧菌則完美地解決了這個(gè)問題,其幾乎沒有刺激性,控菌時(shí)間又長(zhǎng),只不過要求養(yǎng)殖者需要提前2天~3天使用即可,如果在使用補(bǔ)鈣制劑后再使用蛭弧菌,可能繁殖效果會(huì)更好,控菌效果也會(huì)更明顯。

第四、配合化學(xué)消毒劑治療暴發(fā)性疾病。5月~8月份,往往有一些季節(jié)性暴發(fā)的疾病,存在著難治療、易反復(fù)等特點(diǎn),而在使用化學(xué)消毒劑的時(shí)候,往往存在來得快、去得快的問題,這應(yīng)該是易反復(fù)的主要原因,這個(gè)時(shí)候,就可以將化學(xué)消毒劑與蛭弧菌配合使用了,因?yàn)轵位【谶@方面有自己的特性:其見效慢,但見效長(zhǎng)。見效慢是因?yàn)閯偡敝车臅r(shí)候,蛭弧菌需要時(shí)間,一般是24小時(shí)~48小時(shí)才見效;見效長(zhǎng),則是在很多研究中都指明,蛭弧菌控制有害菌的時(shí)間可以長(zhǎng)達(dá)15天左右。

因此,當(dāng)使用化學(xué)消毒劑見效后,在12小時(shí)以后即可使用蛭弧菌類產(chǎn)品,每天一次,連續(xù)2次左右,這樣水體的短期、長(zhǎng)期控菌就可以做到更好。

第五、定期預(yù)防的使用。

定期預(yù)防幾個(gè)關(guān)鍵問題,比如能不能和其他微生物一起使用?多少天使用一次?在上面蛭弧菌的特性中,我們談到其偏向革蘭氏陰性菌,相對(duì)裂解較少的革蘭氏陽性菌。

實(shí)際上徐琴等人(2009)的研究指出,加噬菌蛭弧菌和黏紅酵母組的試驗(yàn)效果不理想,表明這兩株菌體之間有一定的拮抗作用。而聯(lián)合使用噬菌蛭弧菌和球形紅假單胞菌(是紫色非硫光合細(xì)菌紅假單胞菌屬的一個(gè)種)組展示了凈化水質(zhì)、預(yù)防病害的優(yōu)良前景,此組能有效地吸收氨氮、硫化物等有害物質(zhì)。這也指出了蛭弧菌是直接可以和某些光合細(xì)菌直接混合使用的,這一點(diǎn)大大提高了使用的方便性。

另外,淡水漁業(yè)研究中心漁業(yè)環(huán)境保護(hù)研究室陳家長(zhǎng)等人(2003年)曾在螃蟹養(yǎng)殖中,間隔使用光合細(xì)菌和蛭弧菌:每20天用噬菌蛭弧菌和光合細(xì)菌各1次,使用方法為使用光合細(xì)菌1周后使用噬菌蛭弧菌,實(shí)驗(yàn)周期3個(gè)月。其中,蛭弧菌濃度為107cfu/mL,光合細(xì)菌為109cfu/mL。這樣間隔使用的效果也非常不錯(cuò),25天后養(yǎng)殖中華絨螯蟹實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組池塘中的細(xì)菌總數(shù)少2個(gè)數(shù)量級(jí),70天后實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組池塘中的細(xì)菌總數(shù)少3個(gè)數(shù)量級(jí),另外試驗(yàn)池塘的COD、氨氮及硫化物有明顯的降低,有效地提高了中華絨螯蟹的成活率(本文沒有探討如何混合使用)。

總體來說,如果出于預(yù)防考慮,和其他微生物可以間隔使用,這樣最安全。當(dāng)然如果真要混合使用,可以考慮和一些光合細(xì)菌配合,基本上不要考慮酵母或乳酸菌的混合使用了。

另外,間隔使用的話,可以考慮上邊陳家長(zhǎng)等人的方案,即7天用一次其他有益菌,之后再使用蛭弧菌,14天之后再用其他有益菌,形成一個(gè)使用循環(huán),效果更佳。

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